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              [Perfemiker] 鼠尾膠原蛋白I型,無菌溶液,溶解于0.006mol/L HAc

              Collagen, Type I (5mg/ml), from rat tail (訂貨以CAS編碼或英文名稱為準)

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              編號:C20-200110
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              貨號 品牌 規格 純度/含量 標準價 優惠價 庫存貨期 數量 購買
              C20-200110-2ml Perfemiker 2ml 5mg/ml ¥500.00 登錄后可見
              C20-200110-10ml Perfemiker 10ml 5mg/ml ¥1650.00 登錄后可見
              英文名稱: Collagen, Type I (5mg/ml), from rat tail
              詳細描述

              產品別名:Collagen, Type I (5mg/ml), from rat tail
              產品型號:C20-200110
              產品包裝:10mg/2ml
              產品品牌:Perfemiker

              產品描述:溶解于 0.006mol/L HAc,無菌溶液。

               

              運輸和保存方法
              冰袋運輸。4℃保存,有效期1年。不可凍存。

              產品介紹:

                     膠原蛋白(Collagen)是結締組織和內臟器官外基質的主要成分,但在皮膚、肌腱、骨骼中分布*為廣泛。膠原蛋白在結構和遺傳學上被分為不同類型,I型膠原蛋白(Collagen, Type I)結構上是由2個α1鏈和1個α2鏈組成的異源多聚體,在37℃中性條件下可形成3股螺旋結構,被廣泛用于多種細胞的培養基質,如肝細胞、纖維細胞、脊髓神經節、雪旺氏細胞等。另外,I型膠原蛋白在細胞生長、分化、遷移和組織形態的發生等方面也具有重要應用。

                     上海創賽科技的鼠尾膠原蛋白I型 (rat tailtendon collagen type I) 是通過Birkedal-Hansen 的方法,通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養器皿 ,培養一些在普通細胞、培養器皿中不易貼壁的細胞。 也可用于制備三維膠 ,模擬真實的生長環境 ,使細胞在三維環境中生長 。

              shengyou鼠尾膠原蛋白包被pc-12細胞生長照片

              Perfemiker鼠尾膠原蛋白包被的
              培養皿中生長的 PC-12 細胞

              shengyou鼠尾膠原蛋白三維膠NIH-3T3細胞生長照片

              Perfemiker鼠尾膠原蛋白三維膠中
              生長的 NIH-3T3 細胞(接種后 5天)

              shengyou鼠尾膠原蛋白三維膠電泳

              和Sigma鼠尾膠原蛋白(cat# C7661)
              SDS-PAGE 電泳對比。
              A: Sigma B:Perfemiker

               

              使用方法

              1、細胞培養器皿的表面包被 推薦濃度: 1-5ug/cm2

              以包被濃度為 2 ug/cm2 為例:

              用無菌0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/ml。按表 (一)體積加到相應的培養器皿中:

                表面積(cm2 ,每孔或每皿) 加入 0.012mg/ml 膠原的體積 ( ul )
              96孔細胞培養板 0.3 50
              24孔細胞培養板 1.9 300
              12孔細胞培養板 3.8 600
              6孔細胞培養板 9.5 1580
              35mm細胞培養皿 8 1330
              60mm細胞培養皿 21 3500
              100mm細胞培養皿 55 9170

              確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面,開蓋在超凈臺上過夜晾干。 也可以在室溫放置 1小時后,用PBS洗3-4次后直接使用。

              包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3個月以上的時間。

              2、三維膠原的制備

              Perfemiker鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,pH 7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。生友膠原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06X 體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。

              需要的溶液 ( 均需要 無菌 、 預冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚紅用于 pH 指示 )或 10x 培養液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 雙蒸水

              A.不含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):將200ul shengyou鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入 690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入100ul 10xPBS或10x培養液,混勻后立即加到培養器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。將培養器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,轉移到培養箱內。如果配制中使用的是10xPBS,使用前需要加入適當體積的細胞培養液預平衡。

              B.含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準備好懸浮于培養液的細胞,并放置于冰浴中。將200ul Perfemiker鼠尾膠原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入23ul 10xPBS或10x培養液,混勻(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養器皿中。將培養器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當體積的細胞培養液,轉移到培養箱中培養。

               

              使用注意事項:

              鼠尾膠原蛋白I型在室溫下pH中性時可迅速成膠 ,在操作過程中要盡量保持低溫 。

              搜索質檢報告(COA)
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