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鼠尾膠原蛋白I型 澄清牛瘤胃液 PD1/PDL1 重組人 PD-1 頭孢吡普 重組人胰島素
(以IgM抗體為例)
截至2022年3月30日,據國家衛健委相關報道[1]:截至3月30日24時,據31個?。ㄗ灾螀^、直轄市)和新疆生產建設兵團報告,現有確診病例28599例(其中重癥病例66例),累計治愈出院病例116039例,累計死亡病例4638例,累計報告確診病例149276例,現有疑似病例18例。累計追蹤到密切接觸者2306745人,尚在醫學觀察的密切接觸者367516人。病毒肆虐,嚴重影響社會穩定和經濟的發展。 新冠病毒是2019新型冠狀病毒的簡稱,又叫2019-nCoV ,SARS-CoV-2 ,SARS-CoV2。新型冠狀病毒和SARS冠狀病毒(SARS-CoV)是同一類,但不是同一種?;驗閱捂淩AN[2]。目前成熟的新冠病毒檢測方法包括膠體金法、熒光免疫層析法、酶聯免疫法、化學發光法等等。為了方便大家閱讀,小編搜集整理各方法的原理,讓大家一文讀懂各種檢測方法的原理。
1.膠體金法(以間接法為例)[3]
新型冠狀病毒(2019-nCoV)IgM抗體檢測試劑盒(膠體金法)的檢測原理是膠體金標記鼠抗人IgM,同時硝酸纖維素膜上包被新型冠狀病毒抗原,利用膠體金免疫層析間接法的原理達到檢測人血清中新型冠狀病毒IgM抗體的目的。
2. 熒光免疫層析法
新型冠狀病毒IgM抗體檢測試劑盒(熒光免疫層析法)的原理是基于干式熒光標記技術和免疫層析技術,采用全血、血清或血漿作為樣本,配套全自動熒光免疫定量分析儀,全自動穿刺進樣,實現“樣本進、結果出”,最大程度避免產生氣溶膠,降低對操作者和環境污染風險。
3. 酶聯免疫法(以捕獲法為例)
新型冠狀病毒IgM抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)的原理是應用捕獲酶聯免疫吸附分析法,采用抗人IgM單克隆抗體包被反應板,加入校準品或稀釋后的樣品,樣品中的病毒IgM抗體與已包被的單克隆抗體結合形成抗人IgM抗體-IgM抗體復合物,洗滌后加入HRP標記的2019-nCoV N蛋白抗原(E蛋白抗原或S蛋白抗原),形成抗人IgM抗體-IgM抗體-2019-nCoV N蛋白抗原-HRP復合物。洗板后加入TMB底物,復合物上連接的HRP催化底物生成藍色物質,加入終止液后變成黃色,在450nm波長處有特異吸收峰。通過峰值高低對人血清中的2019-nCoV IgM抗體進行定性檢測。
4. 化學發光法(以間接法為例)
新型冠狀病毒抗體檢測試劑盒(化學發光法)的原理是高科技材料磁珠標記病毒的重組蛋白,用于結合血液樣本中的病毒抗體IgM,再使用二抗來識別抗體。二抗上面偶聯了堿性磷酸酶,加入底物后會產生光信號,化學發光儀器通過高靈敏度的PMT(光電倍增管)來檢測光子,從而實現pg(皮克)級別的高靈敏度檢測。
擴展閱讀:新冠病毒感染相關蛋白[4]
Spike蛋白(含S1和S2兩個亞基)是冠狀病毒最重要的致病蛋白,其和人體細胞膜上的跨膜受體蛋白質ACE2結合,從而幫助自己進入細胞內部。S蛋白很大,根據空間結構可以分為S1和S2兩個部分,S1包含受體結合區域(receptor binding domain,RBD),負責識別細胞的受體。S2含有膜融合過程所需的基本元件。目前研究的都是S1-RBD蛋白,是抗體藥物的靶點。
N蛋白與病毒基因組RNA相互纏繞形成病毒核衣殼,在病毒RNA的合成過程中發揮著重要的作用。同時,N蛋白相對保守,在病毒的結構蛋白中所占比例最大,感染早期機體就能產生抗N蛋白的高水平抗體,可以利用N蛋白建立快速檢測2019-nCoV血清抗體方法。
參考文獻:
[1]截至3月30日24時新型冠狀病毒肺炎疫情最新情況 [2][4]新型冠狀病毒結構 [3]新型冠狀病毒幾種檢測試劑盒檢測原理
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